Co-relationship between Escherichia coli in broiler cellulitis and liver lesions / Correlação entre a presença de Escherichia coli em lesões de celulite e fígados de frango

Abstract Pathogenic strains of Escherichia coli may invade the subcutaneous tissue of poultry and cause cellulitis, whilst the pathogen may also cause lesions in internal organs such as the liver. Current paper co-relates Escherichia coli and virulence genes characteristic of Avian Pathogenic Escherichia coli (APEC) in broilers´ cellulitis and liver lesions. One hundred carcasses were retrieved from the production chain in an avian abattoir in the state of Bahia, Brazil, between August 2013 and January 2014, due to detection of cellulitis lesions. Cellulitis and liver samples were retrieved aseptically to quantify E. coli by Petrifilm™ count fast method (3M Company) (AOAC 998.8). Virulent genes iss and iutA were removed from E. coli isolates by Polymerase Chain Reaction (PCR). Escherichia coli was isolated from 82.0% of broilers removed from the production chain and the bacterium was concomitantly detected in cellulitis and liver lesions in 40.0% of broilers. E. coli counts ranged between 1.00 and 4.73 log CFU/g in liver lesions and between 2.00 and 9.00 log UFC/g in cellulitis lesions. Virulent genes iutA and iss were detected in 97.56% and 89.02% of E. coli isolates, respectively. Genotype analysis demonstrated the concomitant amplification of genes iutA and iss in 60.0% (n=40) of samples of cellulitis and liver lesions in which the simultaneous isolation of E. coli occurred. There was a positive and significant co-relationship (r=0.22; p<0.05) between the variables occurrence of E. coli isolated from liver samples and the occurrence of E. coli isolated from cellulitis lesions. There were also positive and significant co-relationships between populations of E. coli from liver isolates and cellulitis lesions (r=0.46; p<0.05) when E. coli isolated in the liver and in cellulitis lesions was detected. Since results showed a relationship between E. coli in cellulitis and liver lesions and possible systemic infection, the occurrence of cellulitis lesions as a criterion for total discarding of carcass may be suggested.

Resumo Cepas patogênicas de Escherichia coli podem invadir o tecido subcutâneo das aves e provocar celulite aviária e este patógeno pode provocar lesões nos órgãos internos, como o fígado. Desta forma, objetivou-se correlacionar a presença de Escherichia coli e os genes de virulência característicos de Escherichia coli Patogênica para Aves (APEC) nas lesões de celulite e nos fígados dos frangos. Entre agosto de 2013 a janeiro de 2014, foram retiradas 100 carcaças da linha de produção por apresentarem lesões de celulite em um matadouro avícola da Bahia (Brasil). Foram coletadas amostras de celulite e fígados de frango assepticamente para quantificação de E. coli pelo método rápido de contagem Petrifilm™ (3M Company) (AOAC 998.8). Em seguida foi realizada a pesquisa dos genes de virulência iss e iutA nos isolados de E. coli utilizando a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). Escherichia coli foi isolada em 82,00% das aves retiradas da linha de produção e a bactéria foi detectada concomitantemente nas lesões de celulite e fígado em 40,00% das aves. As contagens de E. coli variaram de 1,00 a 4,73 log UFC/g nos fígados e de 2,00 a 9,00 log UFC/g nas lesões de celulite. Os genes de virulência iutA e iss foram encontrados em 97,56% e 89,02% dos isolados de E. coli, respectivamente. A análise genotípica revelou a amplificação concomitante dos genes iutA e iss em 60,00% (n=40) das amostras de lesões de celulite e fígado nas quais houve o isolamento simultâneo de E. coli. Foi observada correlação positiva e significativa (r=0,22; p<0,05) entre as variáveis ocorrência de E. coli isolada das amostras dos fígados e ocorrência E. coli isolada das lesões de celulite e, nos casos em que foi detectada a ocorrência de E. coli isolada em fígado e lesões de celulite, correlações positivas e significativas também foram evidenciadas entre as populações de E. coli dos isolados dos fígados e das lesões de celulite, (r=0,46; p<0,05). Assim ficou evidenciada a relação entre E. coli presente nas lesões de celulite e no fígado e uma possível infecção sistêmica, desta forma, sugere-se que a presença de lesões de celulite seja utilizada como critério para o descarte total da carcaça.

Co-relationship between Escherichia coli in broiler cellulitis and liver lesions

Abstract Pathogenic strains of Escherichia coli may invade the subcutaneous tissue of poultry and cause cellulitis, whilst the pathogen may also cause lesions in internal organs such as the liver. Current paper co-relates Escherichia coli and virulence genes characteristic of Avian Pathogenic Escherichia coli (APEC) in broilers´ cellulitis and liver lesions. One hundred carcasses were retrieved from the production chain in an avian abattoir in the state of Bahia, Brazil, between August 2013 and January 2014, due to detection of cellulitis lesions. Cellulitis and liver samples were retrieved aseptically to quantify E. coli by Petrifilm count fast method (3M Company) (AOAC 998.8). Virulent genes iss and iutA were removed from E. coli isolates by Polymerase Chain Reaction (PCR). Escherichia coli was isolated from 82.0% of broilers removed from the production chain and the bacterium was concomitantly detected in cellulitis and liver lesions in 40.0% of broilers. E. coli counts ranged between 1.00 and 4.73 log CFU/g in liver lesions and between 2.00 and 9.00 log UFC/g in cellulitis lesions. Virulent genes iutA and iss were detected in 97.56% and 89.02% of E. coli isolates, respectively. Genotype analysis demonstrated the concomitant amplification of genes iutA and iss in 60.0% (n=40) of samples of cellulitis and liver lesions in which the simultaneous isolation of E. coli occurred. There was a positive and significant co-relationship (r=0.22; p 0.05) between the variables occurrence of E. coli isolated from liver samples and the occurrence of E. coli isolated from cellulitis lesions. There were also positive and significant co-relationships between populations of E. coli from liver isolates and cellulitis lesions (r=0.46; p 0.05) when E. coli isolated in the liver and in cellulitis lesions was detected. Since results showed a relationship between E. coli in cellulitis and liver lesions and possible systemic infection, the occurrence of cellulitis lesions as a criterion for total discarding of carcass may be suggested.

Resumo Cepas patogênicas de Escherichia coli podem invadir o tecido subcutâneo das aves e provocar celulite aviária e este patógeno pode provocar lesões nos órgãos internos, como o fígado. Desta forma, objetivou-se correlacionar a presença de Escherichia coli e os genes de virulência característicos de Escherichia coli Patogênica para Aves (APEC) nas lesões de celulite e nos fígados dos frangos. Entre agosto de 2013 a janeiro de 2014, foram retiradas 100 carcaças da linha de produção por apresentarem lesões de celulite em um matadouro avícola da Bahia (Brasil). Foram coletadas amostras de celulite e fígados de frango assepticamente para quantificação de E. coli pelo método rápido de contagem Petrifilm (3M Company) (AOAC 998.8). Em seguida foi realizada a pesquisa dos genes de virulência iss e iutA nos isolados de E. coli utilizando a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). Escherichia coli foi isolada em 82,00% das aves retiradas da linha de produção e a bactéria foi detectada concomitantemente nas lesões de celulite e fígado em 40,00% das aves. As contagens de E. coli variaram de 1,00 a 4,73 log UFC/g nos fígados e de 2,00 a 9,00 log UFC/g nas lesões de celulite. Os genes de virulência iutA e iss foram encontrados em 97,56% e 89,02% dos isolados de E. coli, respectivamente. A análise genotípica revelou a amplificação concomitante dos genes iutA e iss em 60,00% (n=40) das amostras de lesões de celulite e fígado nas quais houve o isolamento simultâneo de E. coli. Foi observada correlação positiva e significativa (r=0,22; p 0,05) entre as variáveis ocorrência de E. coli isolada das amostras dos fígados e ocorrência E. coli isolada das lesões de celulite e, nos casos em que foi detectada a ocorrência de E. coli isolada em fígado e lesões de celulite, correlações positivas e significativas também foram evidenciadas entre as populações de E. coli dos isolados dos fígados e das lesões de celulite, (r=0,46; p 0,05). Assim ficou evidenciada a relação entre E. coli presente nas lesões de celulite e no fígado e uma possível infecção sistêmica, desta forma, sugere-se que a presença de lesões de celulite seja utilizada como critério para o descarte total da carcaça.

Eficiência produtiva ao desmame de vacas Nelore criadas no pantanal / Productive efficiency to weaning of Nellore cows raised in the pantanal

O trabalho objetivou avaliar a eficiência produtiva de vacas ao desmame de acordo com seu tamanho (peso) e estimar correlação fenotípica entre as características peso do bezerro ao desmame (PBD), peso da vaca ao desmame do bezerro (PVD) e relação desmame (RD = PBD/ PVD) de animais da raça Nelore criados no Pantanal de Mato Grosso do Sul. Foram utilizadas 706 observações para pares de dados de pesos de vacas e de bezerros da raça Nelore ao desmame criados em regime de pastejo. Foram formados seis grupos com base no peso de vaca ao desmame (GPVD) a partir dos desvios (40,73kg) de peso em relação à média geral do rebanho (420,56kg). Os grupos de vacas com menores pesos obtiveram maiores RD. As correlações fenotípicas entre PVD e PBD variaram de 0,05 a 0,26, enquanto para PVD e RD as correlações foram negativas e com variação de 0,11 a 0,25. As correlações fenotípicas entre PBD e RD apresentaram-se positivas e de alta magnitude (0,91 a 0,98). As maiores eficiências produtivas foram determinadas para vacas de pequeno a médio porte (327,20 a 438,62kg), além de estas serem menos exigentes quanto a nutrientes digestíveis totais (NDT). A seleção de vacas de tamanho médio (379, 83 a 461,29kg) apresenta-se mais vantajosa por gerar menor custo de mantença que as vacas maiores e produzir bezerros mais pesados que as vacas menores.

The study aimed to evaluate the productive efficiency of cow at weaning according to their size (weight) and estimated phenotypic correlation between the characteristics of weaning weight of calf and cow and weaning ratio of Nellore cattle raised in the Pantanal of Mato Grosso do Sul. 706 observations were used to weight data pairs of cow and calves at weaning. Six groups were formed based on the weight of cow at weaning from deviations (40.73kg) of weight in relation to the overall mean of the herd (420.56kg). The groups of cows with lower weaning weight have the highest weaning ratio. Phenotypic correlations of cow weight at weaning and weaning of calf weight ranged from 0.05 to 0.26, cow weight at weaning and weaning ratio were negative correlations ranging from -0.11 to -0.25. Phenotypic correlations between weaning of calf and weaning ratio were positive and of high magnitude (0.91 to 0.98). The highest efficiencies were determined for cows between 327.20 and 438.62kg, and are less demanding on total digestible nutrients (TDN). A selection of medium sized cows (379, 83 to 461.29kg) appears more interesting because it has lower maintenance costs than larger cows, and produces heavier calves than the smaller cows.

Assessing the diversity of the virulence potential of Escherichia coli isolated from bacteremia in São Paulo, Brazil

Most of the knowledge of the virulence determinants of extraintestinal pathogenic Escherichia coli (ExPEC) comes from studies with human strains causing urinary tract infections and neonatal meningitis and animal strains causing avian colibacillosis. In this research, we analyzed the phylogenetic background, the presence of 20 ExPEC virulence factors, and the intrinsic virulence potential of 74 E. coli strains isolated in São Paulo, Brazil, from 74 hospitalized patients (43 males and 31 females) with unknown-source bacteremia. Unlike other places in the world, the bacteremic strains originated equally from phylogroups B2 (35%) and D (30%). A great variability in the profiles of virulence factors was noted in this survey. Nevertheless, 61% of the strains were classified as ExPEC, meaning that they possessed intrinsic virulent potential. Accordingly, these strains presented high virulence factor scores (average of 8.7), and were positively associated with 12 of 17 virulence factors detected. On the contrary, the non-ExPEC strains, isolated from 39% of the patients, presented a generally low virulence capacity (medium virulence factor score of 3.1), and were positively associated with only the colicin cvaC gene. These results show the importance of discriminating E. coli isolates that possess characteristics of true pathogens from those that may be merely opportunistic in order to better understand the virulence mechanisms involved in extraintestinal E. coli infections. Such knowledge is essential for epidemiological purposes as well as for development of control measures aimed to minimize the incidence of these life-threatening and costly infections.

Caracterização físico-química e análises por espectrofotometria e cromatografia de Peperomia pellucida L. (H. B. K. ) / Physical chemical characterization and spectrophotometric analysis and chromatography (TLC) of the Peperomia pellucida L. (H. B. K. )

O objetivo deste trabalho foi realizar a caracterização físico-química do pó e da tintura, e análise por espectrofotometria e cromatografia do extrato seco de Peperomia pellucida L. (H. B. K.). As metodologias seguiram a Farmacopéia Brasileira IV ed., com exceção da prospecção química, da espectrofotometria, da obtenção do perfil cromatográfico do extrato seco, e determinação do resíduo seco. A prospecção química revelou a presença de saponinas espumídicas; açúcares redutores; proteínas e aminoácidos; fenóis; taninos; flavonóides; esteróides e triterpenóides. Na análise por CCD, o melhor perfil da fração flavonoídica foi obtido com MeOH/CHOOH (90:10). Foi confirmada, através de CLAE, a presença de 3',4',7-tri-O-metoxiflavona no extrato seco deste material vegetal. Os resultados obtidos contribuem para a determinação de especificações de uma futura monografia em Farmacopéias da Peperomia pellucida L. (H.B.K.).

The aim of this study was the physical chemical characterization of the powder and the tincture, and the chromatographic and spectrophotometric analysis of the Peperomiapellucida L. (H. B. K.) dry extract. The methodology followed the Farmacopeia Brasileira IV ed., except for the chemical prospection, the chromatographic profile obtained and the spectrophotometry of the dry extract, and determination of dried residues. The chemical prospection revealed the presence of foaming saponins; reducing sugars; proteins and amino acids; phenols; tannins; flavonoids; steroids and triterpenoids; depsideos and depsidones. The best profile from TLC for flavonoidic fraction was obtained with methanol/formic acid (90:10 v/v). HPLC confirmed the presence of 3 ',4',7-tri-methoxyflavone in the dry extract of the plant material. The results obtained in this work should contribute for the determination of specifications for a future monograph on Peperomia pellucida L. (H.B.K.).

Ureterocele ectópica em cão: relato de caso / Ectopic ureterocele in a dog: a case report

Relataram-se o quadro clínico, o diagnóstico, o tratamento e o acompanhamento de um cão com ureterocele ectópica e hidronefrose/hidroureter associados. Após as informações obtidas nos exames laboratoriais e de diagnóstico por imagem, o animal foi submetido à ureterocelectomia e à neoureterostomia. O cão apresentou evolução favorável após a conduta terapêutica. Apesar de pouco frequente, a ureterocele deve ser considerada como diagnóstico diferencial em animais jovens com histórico de incontinência urinária.

The clinical features, diagnosis, treatment and monitoring of a dog with an ectopic ureterocele and concomitant hydronephrosis/hydroureter were reported. After the information obtained in laboratory tests and imaging diagnosis, the animal was submitted to ureterocelectomy and neoureterostomy. The dog presented a favorable evolution after the therapy. Although infrequent, the ureterocele should be considered a differential diagnosis in young animals with history of urinary incontinence.

Abordagem sobre os diferentes processos de secagem empregados na obtenção de extratos secos de plantas medicinais / Approach on different drying processes employed for obtaining dry extracts from medicinal plants

Na indústria farmacêutica de fitoterápicos, o extrato seco é considerado tecnologicamente viável para fins de produção em larga escala, devido à estabilidade física, química e microbiológica, além da facilidade de padronização dos princípios ativos. Entre as técnicas de secagem empregadas na preparação de extratos secos, encontra-se a nebulização ou spray-dryer, o leito de jorro, a liofilização e a evaporação rotativa. A escolha do processo de secagem é motivada pela potencialidade dos diferentes equipamentos secadores, na secagem de materiais presentes na forma líquida, no caso, soluções extrativas de plantas medicinais, fornecendo um produto de alta qualidade e com investimento relativamente baixo.

In the pharmaceutical industry of herbal medicines, the dried extract is considered technologically feasible for large-scale production, due to its physical stability, possibility of chemical and microbiological analyses and the ease of standardization of the active ingredients. Among the drying techniques used in the preparation of dry extracts are a mist or spray-dryer, the spouted bed, freeze-drying and rotary evaporation. The choice of the drying process is motivated by the potential of different drying equipments and materials present in liquid form, in this case, solutions of herbal extracts provide a high quality product and a relatively modest investment.

Caracterização genotípica dos isolados de Escherichia coli provenientes de frangos de corte / Genotypically characterization of Escherichia coli isolates from poultry

Caracterizaram-se genotipicamente os isolados de Escherichia coli oriundos de fígado de frangos provenientes de dois matadouros avícolas. Foram coletadas 62 amostras de fígados de frangos, sendo 30 macroscopicamente inalterados e 32 com alteração macroscópica e que originaram no descarte da carcaça. Isolaram-se 30 cepas de Escherichia coli pelo método clássico, sendo 21 isoladas de fígados inalterados e nove provenientes de carcaças rejeitadas. Utilizou-se a reação em cadeia de polimerase para verificação de genes de virulência de E. coli, incluindo o gene de resistência sérica (iss) para identificação de E. coli patogênica para aves, o gene para Shiga cytotoxin 1 e 2 (stx) para identificação de E. coli enteroemorrágica, o gene bfpA para identificação de E. coli enteropatogênica e os genes para toxinas LT-I (elt) e ST-I (stI) para identificação de E. coli enterotoxigênica. Identificou-se iss em 83,3 por cento (25/30) dos isolados, sendo 76,2 por cento (16/21) provenientes de fígados de animais hígidos, e detectou-se stx em 13,3 por cento (4/30). Os genes stx e iss foram identificados em três fígados, caracterizando infecção mista. Os genes não foram observados em um isolado de E. coli pelo método clássico. Faz-se necessária a utilização de tecnologias para identificação e prevenção de Escherichia coli nos aviários e matadouros avícolas.

The isolates of Escherichia coli from chicken livers from two slaughterhouses were genotypically characterized in 62 samples. Thirty samples were macroscopically unchanged and 32 demonstrated alterations that led to the disposal of carcass for sanitary inspection. Thirty Escherichia coli strains from 21 unchanged and 9 from carcasses that were rejected were isolated through the classical method. Polymerase Chain Reaction was performed to verify E. coli virulence of the following genes: serum resistance (iss), to identify avian pathogenic E. coli; Shiga cytotoxin 1 and 2 (stx), to identify enterohaemorrhagic E. col; bfpA, to identify enteropathogenic E. coli; LT-I (elt) and ST-I (stI) toxins to identify enterotoxigenic E. coli. Iss gene was identified in 83.3 percent (25/30), being 76.2 percent (16/21) from E. coli isolated strains from healthy animals. stx gene was identified in 13.3 percent (4/30) of E. coli isolates, and in three of these samples was identified as stx and iss, featuring a mixed infection. The genes were not identified in one E. coli isolated from the classic method. Thus, it is necessary to use advanced technologies to identify and prevent Escherichia coli contamination in poultry farms and slaughterhouses.

Atividade antimicrobiana de extratos etanólicos de Peperomia pellucida e Portulaca pilosa / Antimicrobial activity of ethanol extracts of Peperomia pellucida and Portulaca pilosa

As plantas utilizadas na medicina tradicional estão sendo cada vez mais estudadas por serem possíveis fontes de substâncias com atividades antimicrobianas. Dentre elas, destacando-se a Peperomia pellucida (erva-de-jabuti) e a Portulaca pilosa (amor-crescido), utilizadas comumente na Amazônia. A P. pellucida é utilizada, popularmente, em casos de hemorragia, como curativo para feridas, dores abdominais, abscessos, acne, furúnculos, cólicas, problemas renais, hipertensão e colesterol, enquanto a P. pilosa é utilizada como hepato-protetor, antidiarreico, diurético, para queimaduras, erisipelas e ferimentos. Neste trabalho, foram realizadas a abordagem fitoquímica e a atividade antimicrobiana in vitro desses dois materiais vegetais. A prospecção fitoquímica revelou a presença de açúcares redutores, fenóis e taninos, esteroides e triterpenoides, glicosídios cardíacos e carotenoides no extrato etanólico seco (EES) de P. pillosa, e a presença de proteínas e aminoácidos, fenóis e taninos, flavonoides, esteroides e triterpenoides, azulenos, carotenoides, depsídios e depsidonas no EES de P. pellucida. Para avaliação da atividade antimicrobiana dos extratos etanólicos brutos, foi empregado o método de disco difusão em ágar, nas concentrações de 500; 250; 125 e 62,5 µg/mL. Os extratos testados que apresentaram atividade antimicrobiana na avaliação preliminar foram submetidos à determinação da concentração inibitória mínima (CIM) pela técnica de microdiluição em caldo. O extrato de P. pellucida possui atividade antimicrobiana frente a S. aureus e P. aeruginosa, e o de P. pilosa contra Pseudomonas aeruginosa.

Plants used in traditional medicine are under increasing scrutiny as possible sources of substances with antimicrobial activity. In this article we focus on Peperomia pellucida (erva-de-jabuti) and Portulaca pilosa (amor crescido), both commonly used in the Amazon. P. pellucida is popularly used as a wound dressing, to stop bleeding, and in cases of abdominal pain and cramps, abscesses, acne, boils, kidney problems, hypertension and raised cholesterol, and P. pilosa as a hepato-protective, antidiarrheal and diuretic and for burns, erysipelas and injuries. In this study, we investigated the phytochemistry and antimicrobial activity of extracts of these two plant materials. Phytochemical screening revealed the presence of reducing sugars, phenols and tannins, steroids and terpenoids, cardiac glycosides and carotenoids in the dried ethanol extract (DEE) of P. pilosa and of proteins and amino acids, phenols and tannins, flavonoids, steroids and triterpenoids, azulenes, carotenoids, depsides and depsidones in the P. pellucida DEE. The antimicrobial activity of the ethanol extracts was assayed by the agar disc diffusion method, at concentrations of 500, 250, 125 and 62.5µg/mL. The plant extracts that showed antimicrobial activity in the preliminary assessment were subjected to the broth microdilution test to determine the minimum inhibitory concentration (MIC). The P. pellucida extract had antimicrobial activity against S. aureus and P. aeruginosa and that of P. pilosa against P. aeruginosa.

Bat diversity of Ilha da Marambaia, Southern Rio de Janeiro State, Brazil (Chiroptera, Mammalia) / Diversidade de morcegos da Ilha da Marambaia, Sul do Rio de Janeiro, Brasil (Chiroptera, Mammalia)

Few sites have been well sampled for bats, and samplings in islands are even scarcer. Therefore, the objectives of the present study were: (1) to list the bat species of Ilha da Marambaia; (2) to compare richness, abundance and biomass of bat guilds found there; (3) to analyse abundance patterns of bat species; and (4) to compare richness, abundance and composition of the bat fauna among different kinds of environment. To capture bats we used mist nets set in five different environments, totalising 3559.2 net-hours, during 37 nights between October 2006 and August 2008. A total of 1,133 captures were accomplished, comprising 34 species from five families. The most abundant species was Molossus molossus. Frugivorous bats exhibited higher richness, abundance and biomass if compared to other guilds. Most species (N = 22) exhibited abundances between 1 to 10 percent of all captures. Sixteen species were restricted to just one of the environments sampled. The high richness may be attributed to sampling carried out in several environments, and to the capture of insectivorous species over water bodies.

Poucos são os locais satisfatoriamente amostrados para morcegos e menos ainda as ilhas. Os objetivos deste estudo foram listar as espécies de morcegos da Ilha da Marambaia, comparar a riqueza, abundância e biomassa das guildas de morcegos encontradas, analisar o padrão de abundância das espécies de morcegos e comparar a riqueza, abundância e composição entre os diferentes ambientes amostrados. O método de amostragem consistiu do uso de redes de neblina armadas em cinco ambientes diferentes, totalizando 3559,2 redes-hora, em 37 noites entre outubro de 2006 e agosto de 2008. Foram obtidas 1.133 capturas, compreendendo 34 espécies de cinco famílias. A espécie mais abundante foi Molossus molossus. Os frugívoros apresentaram maior riqueza, abundância e biomassa. A maior parte das espécies (N = 22) apresentou abundâncias entre 1 e 10 por cento do total de capturas. Dezesseis espécies foram restritas a apenas um dos ambientes amostrados. A elevada riqueza encontrada pode ser atribuída à realização de coletas em vários ambientes, e a captura de espécies insetívoras sobre a água.

The use of polymerase chain reaction for early diagnosis of tuberculosis in Mycobacterium tuberculosis culture

Early diagnosis plays a vital role in controlling tuberculosis. The conventional methodology is slow, with results taking several weeks, in addition to having low sensitivity, especially in clinical paucibacillary samples. The objective of this study was to evaluate the use of polymerase chain reaction (PCR) on solid medium culture for a rapid diagnosis of tuberculosis, mainly in cases of negative sputum smears. Forty sputum samples were collected from inpatients with tuberculosis treated for less than 2 days. Bacilloscopy, PCR for sputum, culture on Lõwestein-Jensen (LJ) solid medium, and daily PCR from culture were performed on each sample. DNA extracted from the BCG vaccine, which contains attenuated bacillus Calmette-Guérin, was used as the positive control. Smear microscopy showed 68.6 percent sensitivity, 80 percent specificity, 96 percent positive predictive value, and 26.7 percent negative predictive value, with culture on LJ medium as the gold standard. Culture at day 28 showed 74.3 percent sensitivity and 100 percent specificity. PCR of DNA extracted from sputum amplified a 1027-bp fragment of the 16s RNA gene, showing 22.9 percent sensitivity and 60 percent specificity. PCR performed with DNA extracted from daily culture showed that, from the 17th to the 40th day, the sensitivity (85.7 percent) and specificity (60 percent) were constant. We conclude that a 17-day culture is a good choice for rapid diagnosis and to interfere with the transmission chain of tuberculosis.

Topografia do cone medular em gatos sem raça definida / Topography of the medullar cone in the domestic non-defined breed cat

Estudou-se a topografia post mortem do cone medular em 30 gatos adultos sem raça definida. Procedeu-se à remoção da pele e da musculatura dorsal da coluna vertebral e expuseram-se a medula espinhal e seus envoltórios, após a secção dos arcos vertebrais. O cone medular foi evidenciado e mensurado. Avaliou-se a sua relação com as vértebras lombares (L), sacrais (S) e caudais (Cd). O cone medular variou de 3,40 a 8,00cm (média=5,08cm). A esqueletopia foi variável, pois em 24 (80 por cento) animais o cone medular iniciou-se na vértebra L6; em quatro (13,3 por cento), na L7; e em dois (6,7 por cento), na L5. Em 12 (40 por cento) animais terminou na vértebra S2; em 10 (33,3 por cento), na S3; em cinco (16,7 por cento), na Cd1; em dois (6,7 por cento), na S1; e em um (3,3 por cento) na Cd2.

It was studied the post mortem topography of the medullar cone in 30 adult non-defined breed cats. The dorsal skin and muscles from the vertebral column were removed and the spinal cord and its wrappers were visualized, after the section of the vertebral arcs. The medullar cone was then exposed and measured. Its relationship with lumbar (L), sacral (S), and caudal (Cd) vertebrae was determined. The length of the medullar cone presented a variation from 3.40 to 8.00cm (average 5.08cm). Its skeletopy was variable; since in 24 animals (80 percent), the medullar cone began at the L6 vertebra; in four (13.3 percent), at the L7; and in two (6.7 percent) at the L5 vertebra. It ended in 12 (40 percent) animals at the S2 vertebra; in 10 (33,33 percent), at the S3; in five (16.7 percent) at the caudal (Cd) vertebra; in two (6.7 percent), at the S1; and in one (3.3 percent), at the Cd2.

Chitosan-alginate capsules as oral delivery system for insulin: studies in vitro and in vivo

The aim of this study was to assess chitosan: alginate capsules as gastric resistant systems for oral administration of insulin. Chitosan: alginate capsules ofi nsulin were tested in simulated gastric and intestinal media and in vivo. The capsules released only about 20% of the insulin after 60 minutes of incubation in simulated gastric medium. On the other hand, almost all the encapsulated insulin was released after being incubated for 90 min in simulated intestinal medium. When capsules containing 20 IU and 40 IU insulin were given to rats by gavage, signifi cantly reduced plasma glucose levels were observed (33.7 % and 51.7%, respectively) two hours after the treatment, which returned to normal after six hours. These results indicate that chitosan: alginate capsules are potential carriers for oral protein delivery.

Efeitos cardiovasculares e neuroendócrinos do butorfanol e da buprenorfina em cães anestesiados pelo desfluorano / Cardiovascular and neuroendocrine effects of butorphanol and buprenorphine in dogs anesthetized with desflurane

Avaliaram-se os efeitos do butorfanol e da buprenorfina sobre variáveis cardiovasculares e neuroendócrinas em cães anestesiados com desfluorano, utilizando-se 30 cães adultos, machos e fêmeas, distribuídos em três grupos denominados grupo butorfanol (GBT), grupo buprenorfina (GBP) e grupo-controle (GCO). A anestesia foi induzida com propofol (8mg/kgIV) e nos animais intubados administrou-se desfluorano (1,5CAM). Após 30 minutos, nos cães do GBT, aplicou-se butorfanol (0,4mg/kgIM); nos do GBP, buprenorfina (0,02mg/kgIM); e nos do GCO, solução de NaCl a 0,9 por cento (0,05ml/kgIM). Avaliaram-se: freqüência cardíaca; pressões arteriais sistólica, diastólica e média; débito cardíaco; pressão venosa central; cortisol; hormônio adrenocorticotrópico; noradrenalina; e glicose. As colheitas dos dados foram feitas aos 30 minutos após o início da administração do desfluorano (M0), 15 minutos após a administração do opióide ou placebo (M15), e a cada 15 minutos após M15 (M30, M45, M60 e M75). Para a avaliação neuroendócrina utilizaram-se os momentos M-30 (antes da administração dos fármacos), M0, M15 e M45. Na freqüência cardíaca houve diferença entre M0 e M15 (129 e 111bat/min) em GBT, e entre M0 e M30 (131 e 112bat/min) em GBP. Na pressão arterial média, a diferença foi entre M0 (86mmHg) e todos os momentos que se seguiram (todos os valores foram menores que 72mmHg), em GBT. A pressão arterial diastólica foi menor em todos os momentos (<53mmHg) quando comparada com a do M0 (67mmHg), em GBT. Na pressão arterial sistólica, a diferença foi entre M0 e M15 e M30 (112 versus 93 e 94mmHg, respectivamente) em GBT. A inclusão dos opióides determinou discreta redução nos parâmetros cardiovasculares, enquanto o desfluorano interferiu na função neuroendócrina elevando os níveis plasmáticos de glicose.

The effects of butorphanol and buprenorphine on cardiovascular and neuroendocrine variables in dogs anesthetized with desflurane were studied. Thirty adult healthy, males and females, mongrel dogs were distributed in three groups denominated butorphanol group (BTG), buprenorphine group (BPG) and control group (COG). The anesthetic induction was done using propofol (8mg/kg, IV), and immediately, the dogs were intubated and submited to desflurane anaesthesia (1.5 MAC). After 30 minutes, the BTG animals received butorphanol (0.4mg/kg IM), the BPG animals buprenorphine (0.02mg/kg IM) and the COG animals saline solution at 0.9 percent (0.05 ml/kg IM). Heart rate; systolic, diastolic and mean arterial blood pressures; cardiac output; venous central pressure; cortisol; ACTH; noradrenalin; and glucose were measured. The measurements were recorded at 30 minutes after beginning the inhalatory anaesthesia (M0) and at 15 minutes after opioid or saline administration (M15). Also a serial measurements were carried out in 15-minute intervals after M15 (M30, M45, M60 and M75). For neuroendocrine evaluation measurements were recorded before desflurane administration (M-30), and at M0, M15 AND m45. For heart rate there were differences between M0 and M15 (129 and 111 beats/min) in BTG, and between M0 and M30 (131 and 112 beats/min), in BPG. For mean arterial blood pressure there were differences between M0 (86mmHg) and all the recorded measurements (all measurements were lower than 72mmHg), in BTG. All recorded diastolic arterial blood pressures were lower than 53mmHg and different of the recorded measure M0 (67mmHg), in BTG. For systolic arterial blood pressure there were differences between M0 and M15 and M30 (112 vs 93 and 94mmHg, respectively), in BTG. Opioids administration determined discrete reduction in cardiovascular parameters while desflurane caused alterations in neuroendocrine function, increasing plasmatic levels of glucose.

Determination of calcium by atomic absorption spectrophometry applied to the preparation of alginate: chitosan complexes

Polysaccharides, as alginate and chitosan, have been used to obtain modified release dosage forms. Alginate, due to its porperty of building gels during complex formation with calcium ions, allows the building of capsules containing a core constituted by calcium alginate. This work had for objective to determine the appropriate calcium concentration for the preparation of alginate-chitosan capsules, by means of calcium quantification using atomic absorption spectrophotometry. The methodology of calcium quantification was validated through analysis of the limit of detection, precision, accuracy and recovery of the method. The capsules, containing or not the drug, were prepared by the complex coacervation/ionotropic gelification method. Calcium was quantified after samples mineralization and dilution in lantanium solution. The results showed that the amount of calcium incorporated into the capsules depends on the amount of calcium added to the medium, and this ratio increases until the concentration of 1,5% of initial calcium chloride and above this concentration there is a decrease in the proportion of calcium bonded. It was observed that the proportion of calcium that links to the polymer is inversely proportional to the amount of calcium added. The calcium amount incorporated depends on the concentration of the polymeeric dispersions used as well as on the between the two polymers

A broncofibroscopia no diagnóstico etiológico de afecçöes pulmonares em pacientes com síndrome da imunodeficiência adquirida / Bronchofibroscopy in the etiologic diagnosis of lung diseases in patients with acquired immunodeficiency syndrome

OBJETIVO: Avaliar o papel da broncofibroscopia no diagnóstico etiológico de pneumopatias em pacientes positivos ao vírus da imunodeficência humana. MÉTODOS: O presente estudo analisa um grupo de 49 pacientes com diagnóstico de síndrome da imunodeficiência adquirida, admitidos no Hospital Nereu Ramos - Florianópolis -SC. Foram selecionados pacientes sintomáticos respiratórios com lesão simples ao exame radiográfico do tórax, sem diagnóstico etiológico confirmado por exame de escarro. Tais pacientes foram submetidos à broncofibroscopia com realização de lavado broncoalveolar, escovado brônquico e biópsia pulmonar transbrônquica. As amostras foram analisados com bacterioscopia pelo Gram, pesquisa de BAAR, citomegalovírus, P. carinii e outros fungos. RESULTADOS: A broncofibroscopia foi efetiva na realização do diagnóstico etiológico em 71,43 por cento dos casos. A biópsia pulmonar transbrônquica foi a técnica com maior positividade, firmando o diagnóstico em 59,18 por cento dos casos. A técnica com menor positividade foi o escovado brônquico, com diagnóstico em 4,08 por cento dos casos. O agente etiológico mais freqüente foi o P. carinii (42,8 por cento ), seguido pelo M. tuberculosis (22,86 por cento ). Nenhuma complicação foi observada nos procedimentos realizados. CONCLUSÃO: Concluímos no presente estudo que neste grupo de pacientes a broncofibroscopia foi um procedimento seguro e efetivo para o diagnóstico etiológico de afecções pulmonares.

Diffuse adherence, ST-I enterotoxin and CFA/IV colonization factor are encoded by the same plasmid in the Escherichia coli O29: H21 strai

Escherichia coli O29:H21 is a human enterotoxigenic serotype that produces heat-stable (ST-I) enterotoxin, adheres diffusely to HeLa cells, and presents colonization factor antigen IV (CFA/IV) composed of CS5CS6 surface antigens. In one strain studied the genes for diffuse adherence and CFA/IV (CS5CS6) production were found to be present in the same plasmid encoding ST-I. The virulence plasmid (Ent) presented two unrelated basic replicons homologous to repFIC and repW. Gene(s) encoding diffuse adherence did not share homology with the probe for F1845 fimbrial adhesin which is responsible for this phenotype in other E. coli strains. Ent plasmid containing genes for diffuse adherence have not been described previously.

Development of an enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) for detection of anti-native DNA antibodies using DNA from "Crithidia luciliae" as substrate

DNA de cinetoplasto de Crithidia luciliae (kDNA) foi isolado e purificado para desenvolvimento de ensaio imunoenzimático para detecçao de anticorpos anti-DNA nativo. O kDNA foi obtido por lise das células com dodecil sulfato de sódio (SDS) e pronase E e purificado por ultracentrifugaçao sobre soluçao de sacarose a 20 por cento e extraçao protéica. A pureza do kDNA foi verificada pela razao de densidades ópticas a 260 e 280nm e por eletroforese em gel de agarose, após digestao com as enzimas de restriçao HindIII e HaeIII. DNA de timo de vitelo, DNA plasmidial bacteriano e DNA cromossômico de Micrococcus lysodeikticus foram também empregados como substrato para ELISA. Foram testados 158 soros de pacientes atendidos no ambulatório da Disciplina de Reumatologia da Escola Paulista de Medicina, UNIFESP, sendo 65 com lúpus eritematoso sistêmico (LES), 30 com artrite reumatóide, 27 com esclerose sistêmica e 36 com outras doenças reumáticas auto-imunes. Foram também testados 105 soros obtidos de pacientes que estavam sendo investigados quanto a apresentarem LES e 30 soros de controles sadios. Nossos resultados mostraram que o kDNA pode ser purificado e utilizado com sucesso como substrato alternativo em ELISA. Entretanto, o mesmo nao ocorre com DNA cromossômico obtido de M. lysodeikticus, mostrando a necessidade de avaliaçao cuidadosa da fonte de DNA para detecçao de anticorpos anti-DNA, em testes imunoenzimáticos